威尼德分子杂交仪:核酸分子杂交中造成高背景的影响因数
来源:壹点网 发布时间:2022-07-26 16:02:25

威尼德生物科技(北京)有限公司,研发生产的经济型分子杂交仪VH-1000、多功能型分子杂交仪VH-4000、组合型分子杂交仪VH-2000,底部标配培养皿圆周运动托盘,选配250ML/500ML锥形瓶托盘, 96孔酶标板托盘,可适用于如放置杂交袋等其他严格要求的孵育实验,,以及膜洗脱和凝胶脱色,同时可以做恒温微生物培养。分子杂交仪是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免破损带来的污染危害。

1 杂交溶液或洗涤溶液在使用前未预热

2 探针浓度过高或探针未变性。将杂交液装入杂交管时,体积减少,探针浓度发生了变化,应确保相应地调整探针浓度。

3 未从探针溶液中去除未结合核苷酸。

4 预杂交和杂交溶液中的预杂交或阻断剂不足,充分的预杂交对于阻止膜的非特异性杂交非常重要。

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5 杂交或洗脱条件不够严格:

6 降低盐浓度。

7 提高温度。

8 增加SDS的浓度。

9 增加洗脱次数。

10 膜太干燥,这通常可能是明显重叠问题的原因,可能由以下原因引起:

11 探针体积太小。溶液更换速度太慢,尤其是批量更换处理时分子杂交仪放置不平整。

可变轴角度过大。

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12 膜上残留的琼脂糖可能导致背景模糊。在转化膜后和固定交联前(尤其是真空吸干后),应在2 x SSC中冲洗膜,以去除残留的琼脂糖和多余的盐。

13 多个过滤器在瓶子中没有用筛网隔开。

14 放射自显影问题。放射自显影图上的随机黑点和“闪电”标记可能是由静电引起的。

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